Gibco血清是細胞培養(yǎng)中重要的元素之一,今天我們?yōu)榇蠹艺砹艘恍┭迨褂迷趯嶒炇依锍龅降膯栴}供參考:
1.血清保存的好方法是什么?
建議血清應(yīng)保存在-5至-2O℃環(huán)境下。然而若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2.血清的解凍技巧是什么?
建議將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。血清解凍后若發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
3.為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
因此建議大家若非必須,可不需要做熱處理這一步。如此一來不但節(jié)省您寶貴的時間,更確保血清的質(zhì)量。